特異性IgE檢測是一種常用的過敏原診斷方法。它的作用原理是通過檢測血液中特異性IgE抗體的存在來確定患者是否對某種過敏原產(chǎn)生了過敏反應(yīng)。
特異性IgE檢測有多種方法,包括皮膚劃痕試驗、皮內(nèi)試驗、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)和免疫印跡等技術(shù)。下面將分別介紹這些方法的操作步驟。
皮膚劃痕試驗
皮膚劃痕試驗是簡單和常用的特異性IgE檢測方法之一。其操作步驟如下:
(1)選擇合適的部位:在前臂或上臂背側(cè)選取清潔、無損傷的皮膚。
?。?)標記:用水筆在皮膚上劃出15mm*15mm的正方形,并在正方形內(nèi)使用同一針頭劃3-4個小孔。
?。?)加入過敏原:使用專業(yè)的劃痕器,在每個小孔處滴入不同的過敏原溶液。
?。?)刺激:用劃痕器在每個小孔處輕輕劃過皮膚表面,使過敏原能夠穿過皮膚進入組織內(nèi)。
?。?)觀察:等待15-20分鐘后,觀察皮膚上是否出現(xiàn)紅斑或水皰等過敏反應(yīng)。
皮內(nèi)試驗
皮內(nèi)試驗是一種更加靈敏的特異性IgE檢測方法。其操作步驟如下:
?。?)選擇合適的部位:在前臂或上臂背側(cè)選取清潔、無損傷的皮膚。
(2)標記:用水筆在皮膚上劃出15mm*15mm的正方形,并在正方形內(nèi)使用同一針頭注射不同濃度的過敏原溶液。
?。?)觀察:等待15-20分鐘后,觀察皮膚上是否出現(xiàn)紅斑或水皰等過敏反應(yīng)。
?。?)測量:使用皮膚反應(yīng)直徑測量工具測量皮膚反應(yīng)的大小,并對結(jié)果進行記錄和分析。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)
ELISA是一種基于抗體與抗原結(jié)合的檢測方法,也可以用于檢測特異性IgE。其操作步驟如下:
(1)制備樣品:采集患者血液樣品,并將其離心分離血清。
?。?)制備檢測板:在96孔板上固定過敏原或抗原,并用BSA(牛血清白蛋白)等物質(zhì)封閉孔洞,避免非特異性結(jié)合。
(3)加入樣品:將標記有酶的抗IgE抗體添加到每個孔中,然后加入患者血清樣品,使其與被固定的抗原結(jié)合。
?。?)洗滌:移除未結(jié)合的物質(zhì)。
(5)加入底物:加入底物,使標記的酶能夠反應(yīng),產(chǎn)生發(fā)光信號。
?。?)測量:使用ELISA閱讀器測量每個孔的發(fā)光信號強度,并對結(jié)果進行分